1. Celo: Ĉi tiu proceduro celas provizi normigitan proceduron por asepsaj operacioj kaj protekto de sterilaj ĉambroj.
2. Aplika amplekso: biologia testa laboratorio
3. Respondeculo: Kontrolanto de kvalitkontrolo
4. Difino: Neniu
5. Sekurecaj antaŭzorgoj
Strikte plenumu asepsajn operaciojn por preventi mikroban poluadon; funkciigistoj devas malŝalti UV-lampon antaŭ ol eniri sterilan ĉambron.
6. Proceduroj
6.1. Sterila ĉambro devus esti ekipita per sterila operaciejo kaj bufroĉambro. La pureco de la sterila operaciejo devus atingi klason 10000. La interna temperaturo devus esti konservata je 20-24°C kaj la humideco devus esti konservata je 45-60%. La pureco de la pura benko devus atingi klason 100.
6.2. Sterila ĉambro devas esti tenata pura, kaj estas strikte malpermesite amasigi rubon por malhelpi poluadon.
6.3. Strikte malebligi poluadon de ĉiuj steriligaj ekipaĵoj kaj kulturmedioj. Tiuj, kiuj estas poluitaj, devas ĉesi uzi ilin.
6.4. Sterila ĉambro estu ekipita per desinfektaĵoj kun funkcianta koncentriĝo, kiel ekzemple 5%-krezola solvaĵo, 70%-alkoholo, 0.1%-klormetionina solvaĵo, ktp.
6.5. Sterila ĉambro estu regule steriligata kaj purigata per taŭga desinfektaĵo por certigi, ke la pureco de la sterila ĉambro plenumas la postulojn.
6.6. Ĉiuj instrumentoj, pladoj kaj aliaj objektoj, kiujn oni devas alporti en sterilan ĉambron, estu bone envolvitaj kaj steriligitaj per taŭgaj metodoj.
6.7. Antaŭ ol eniri la sterilan ĉambron, la dungitaro devas lavi siajn manojn per sapo aŭ desinfektaĵo, kaj poste ŝanĝi sin al specialaj laborvestoj, ŝuoj, ĉapeloj, maskoj kaj gantoj en la bufroĉambro (aŭ viŝi siajn manojn denove per 70%-a etanolo) antaŭ ol eniri la sterilan ĉambron. Faru operaciojn en la bakteria ĉambro.
6.8. Antaŭ ol uzi sterilan ĉambron, la ultraviola lampo en la sterila ĉambro devas esti ŝaltita por surradiado kaj steriligo dum pli ol 30 minutoj, kaj la pura benko devas esti ŝaltita samtempe por aerblovado. Post kiam la operacio estas finita, la sterila ĉambro devas esti purigita ĝustatempe kaj poste steriligita per ultraviola lumo dum 20 minutoj.
6.9. Antaŭ inspektado, la ekstera pakaĵo de la testprovaĵo devas resti sendifekta kaj ne devas esti malfermita por eviti poluadon. Antaŭ inspektado, uzu 70%-alkoholajn vatglobetojn por desinfekti la eksteran surfacon.
6.10. Dum ĉiu operacio, negativa kontrolo devus esti farita por kontroli la fidindecon de asepsa operacio.
6.11. Kiam vi sorbas bakterian likvaĵon, vi devas uzi suĉpilkon por absorbi ĝin. Ne tuŝu la pajleton rekte per via buŝo.
6.12. La inokula nadlo devas esti steriligita per flamo antaŭ kaj post ĉiu uzo. Post malvarmigo, la kulturo povas esti inokulita.
6.13. La pajletoj, provtuboj, petri-pladoj kaj aliaj iloj enhavantaj bakterian likvaĵon estu trempitaj en steriliga sitelo enhavanta 5%-an Lysol-solvaĵon por desinfektado, kaj elprenitaj kaj ellavitaj post 24 horoj.
6.14. Se bakteria likvaĵo disverŝiĝas sur tablon aŭ plankon, tuj verŝu 5%-an karbolatan acidan solvaĵon aŭ 3%-an Lysol-on sur la poluitan areon dum almenaŭ 30 minutoj antaŭ ol trakti ĝin. Kiam laborvestoj kaj ĉapeloj estas poluitaj per bakteria likvaĵo, ili tuj estu demetitaj kaj lavitaj post altprema vapora steriligo.
6.15. Ĉiuj objektoj enhavantaj vivajn bakteriojn devas esti desinfektitaj antaŭ ol esti lavitaj sub la krano. Estas strikte malpermesite polui la kloakon.
6.16. La nombro da kolonioj en sterila ĉambro estu kontrolata ĉiumonate. Kun malfermita la pura benko, prenu kelkajn sterilajn petri-pladojn kun interna diametro de 90 mm, kaj asepse injektu ĉirkaŭ 15 ml da nutra agaragar-kulturmedio, kiu estis fandita kaj malvarmigita ĝis ĉirkaŭ 45 °C. Post solidiĝo, metu ĝin renverse je 30 ĝis 35 °C. Inkubu dum 48 horoj en inkubatoro. Post pruvo de sterileco, prenu 3 ĝis 5 platojn kaj metu ilin maldekstre, meze kaj dekstre de la laborpozicio. Post malfermo de la kovrilo kaj eksponado dum 30 minutoj, metu ilin renverse en inkubatoron je 30 ĝis 35 °C dum 48 horoj kaj elprenu ilin. Ekzamenu. La averaĝa nombro da diversaj bakterioj sur la plato en pura areo de klaso 100 ne superu 1 kolonion, kaj la averaĝa nombro en pura ĉambro de klaso 10000 ne superu 3 koloniojn. Se la limo estas superita, la sterila ĉambro estu plene desinfektita ĝis ripetaj inspektoj plenumos la postulojn.
7. Vidu la ĉapitron (Metodo de Sterileca Inspektado) en "Metodoj de Higiena Inspektado de Medikamentoj" kaj "Ĉiniaj Normaj Funkciaj Praktikoj por Medikamenta Inspektado".
8. Distribua Sekcio: Sekcio pri Kvalitadministrado
Teknika gvido por pura ĉambro:
Post akiro de sterila medio kaj sterilaj materialoj, ni devas konservi sterilan staton por studi specifan konatan mikroorganismon aŭ utiligi iliajn funkciojn. Alie, diversaj mikroorganismoj de ekstere povas facile miksiĝi. La fenomeno de la miksado de nerelevantaj mikroorganismoj de ekstere nomiĝas poluado de bakterioj en mikrobiologio. Malhelpi poluadon estas kritika tekniko en mikrobiologia laboro. Kompleta steriligo unuflanke kaj preventado de poluado aliflanke estas du aspektoj de asepsa tekniko. Krome, ni devas malhelpi la studatajn mikroorganismojn, precipe patogenajn mikroorganismojn aŭ genetike modifitajn mikroorganismojn, kiuj ne ekzistas en la naturo, eskapi el niaj eksperimentaj ujoj en la eksteran medion. Por ĉi tiuj celoj, en mikrobiologio ekzistas multaj rimedoj.
Sterila ĉambro estas kutime malgranda ĉambro speciale aranĝita en mikrobiologia laboratorio. Povas esti konstruita el folioj kaj vitro. La areo ne estu tro granda, ĉirkaŭ 4-5 kvadrataj metroj, kaj la alto estu ĉirkaŭ 2,5 metroj. Bufroĉambro estu starigita ekster la sterila ĉambro. La pordo de la bufroĉambro kaj la pordo de la sterila ĉambro ne estu direktitaj al la sama direkto por malhelpi aerfluon enporti diversajn bakteriojn. Kaj sterila ĉambro kaj bufroĉambro devas esti hermetikaj. Endoma ventolado devas havi aerfiltrajn aparatojn. La planko kaj muroj de la sterila ĉambro devas esti glataj, malfacile entenante malpuraĵon kaj facile purigeblaj. La laborsurfaco estu ebena. Kaj sterila ĉambro kaj bufroĉambro estas ekipitaj per ultraviolaj lumoj. La ultraviolaj lumoj en la sterila ĉambro estas 1 metron for de la laborsurfaco. Personaro eniranta sterilan ĉambron devas porti steriligitajn vestaĵojn kaj ĉapojn.
Nuntempe, sterilaj ĉambroj plejparte ekzistas en mikrobiologiaj fabrikoj, dum ĝeneralaj laboratorioj uzas purajn benkojn. La ĉefa funkcio de la pura benko estas uzi lamenan aerfluan aparaton por forigi diversajn etajn polvojn, inkluzive de mikroorganismoj, sur la laborsurfaco. La elektra aparato permesas al aero trairi HEPA-filtrilon kaj poste eniri la laborsurfacon, tiel ke la laborsurfaco ĉiam estas sub la kontrolo de fluanta sterila aero. Krome, estas rapida aerkurteno sur la flanko proksime al la ekstero por malhelpi la eniron de ekstera bakteria aero.
En lokoj kun malfacilaj kondiĉoj, lignaj sterilaj skatoloj ankaŭ povas esti uzataj anstataŭ puraj benkoj. La sterila skatolo havas simplan strukturon kaj estas facile movebla. Estas du truoj sur la fronto de la skatolo, kiuj estas blokitaj per puŝ-tiraj pordoj kiam ĝi ne funkcias. Vi povas etendi viajn brakojn dum funkciado. La supra parto de la fronto estas ekipita per vitro por faciligi la internan funkciadon. Estas ultraviola lampo interne de la skatolo, kaj ilaro kaj bakterioj povas esti enmetitaj tra malgranda pordo sur la flanko.
Asepsaj funkciigaj teknikoj nuntempe ne nur ludas pivotan rolon en mikrobiologia esplorado kaj aplikoj, sed ankaŭ estas vaste uzataj en multaj bioteknologioj. Ekzemple, transgena teknologio, monoklona antikorpa teknologio, ktp.
Afiŝtempo: 6-a de marto 2024